超高速離心機的分離方法

2015-10-21 09:29:454636打印

    1.差速離心:逐次增加離心力,每次可沉降樣品溶液(yè)中的一些(xiē)組份。


    差速(sù)離心是一種最常用的方法。在(zài)這種(zhǒng)方法中,離心管在開始時(shí)裝(zhuāng)滿了均一(yī)的樣品溶液。通(tōng)過(guò)在一定速度下一定時間的離心後,就(jiù)可得到兩個部份:沉澱和

上清液。


    通常在第一次離心時把大部分不需要的大(dà)粒子沉降去掉。這時所(suǒ)需的組(zǔ)份大部分仍留在上清液中(zhōng)。然後將收集到的上清液以更高速度離(lí)心,把(bǎ)所需的粒子沉積

下(xià)來。離心的時間要選擇得當(dāng),使大部份不需(xū)要的更小的粒子仍留在上清(qīng)液中(zhōng)。對於得到的沉澱和上清液可以進行進一步的(de)離心(xīn),直到達到所需(xū)要的分離(lí)純度為止。



    差速離心的特點是操作(zuò)簡單,但分離純度不高。


    2.密度梯度離心法:可以同時使樣品中(zhōng)幾個或全(quán)部組(zǔ)份分離,具有(yǒu)很好的(de)分辨率。


    (1)速(sù)率區帶法:


    根據樣(yàng)品中不同粒子所具有的不同的尺寸大小及沉降(jiàng)速度(S)。


    大(dà)致步驟如(rú)下:


    在離心管中裝入密度梯度溶液,溶液的密度從離心管頂部至底部逐漸增加(正梯度)。


    將所需分離的樣品小(xiǎo)心地加至密度梯(tī)度溶液的頂部(bù)。樣品在梯度溶液表(biǎo)麵形成一負梯度。


    由於不同大小的粒子在(zài)離心力作用下,在梯(tī)度(dù)中移動的速度不一樣,所以經過離心後會形成幾條(tiáo)分(fèn)開的樣品區帶。


    樣品粒子的密(mì)度必須大於梯(tī)度液注中任一點的密度。離心過程必須在區帶到達管子底部前停止。


    (2)等密(mì)度離心法:


    根據粒子的不同密度來分離。離心(xīn)過(guò)程中(zhōng),粒子會移至與它本身密度(dù)相同的地(dì)方形成區帶(dài)。


    密度樣度的選擇要使梯(tī)度的範圍包括所有待分離粒子的密度。樣品可(kě)以在密度梯度液粒上麵或(huò)均勻(yún)分布在密度(dù)梯度中。經離心後,樣品粒子達到它們的(de)平衡點。


    平衡後粒子的分離完全由其密度決定,與時間無關,此時再改變離心轉速,隻(zhī)能改變區帶的相對位置。


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